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20201675

RAA技術介紹及實驗操作演示 法語男聲

時間:2020-04-16 點擊:142次

摘要
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RAA技術介紹及實驗操作演示

RAA technical introduction and experimental operation demonstration

Introduction technique du RAA et doublage de démonstration d’opération expérimentale

 

RAA技術是重組酶介導等溫核酸擴增技術的簡稱,是中國自主原創的分子診斷專利技術。

RAA technology is the abbreviation of recombinase-mediated isothermal nucleic acid amplification technology, and is a patented molecular diagnostic technology independently developed by China.

La technologie RAA est l'abréviation de technologie d'amplification d'acide nucléique isothermique médiée par la recombinase. Il s'agit d'une technologie de diagnostic moléculaire brevetée développée indépendamment par la Chine

RAA技術是一種利用重組酶、單鏈結合蛋白、DNA聚合酶在等溫條件下(最佳溫度37℃)進行核酸擴增的技術。

The RAA technique is a technique for performing nucleic acid amplification under isothermal conditions (optimal temperature 37 ° C), using a recombinase, a single-stranded binding protein, and a DNA polymerase.

La technique RAA est une technique permettant de réaliser une amplification d'acide nucléique dans des conditions isothermes (température optimale à 37 ° C), en utilisant une recombinase, une protéine de liaison à un seul brin et une ADN polymérase.

具體原理為:重組酶、單鏈結合蛋白、引物形成復合體掃描雙鏈DNA,在與引物同源的序列處使雙鏈DNA解旋,單鏈結合蛋白(SSB)與解旋后的單鏈結合,防止DNA復性,在能量和dNTP存在的情況下,由DNA聚合酶完成鏈的延伸,不斷重復這一過程, 515分鐘之內就可以實現用儀器檢測到擴增信號。

與傳統的PCR技術相比,RAA技術具有等溫、快速、便攜、靈敏、特異、設備便宜、操作簡單等優點,適用于檢驗檢疫、疾病預防控制、食品安全、物種鑒定、環境微生物檢測、體外診斷等領域,現已應用于急性傳染病診斷、POCT、疾病早篩等方面。已經開發完成人呼吸道合胞病毒,人腺病毒3型和7型,人乙型肝炎病毒,百日咳鮑特菌,結核分支桿菌,血吸蟲非洲豬瘟病毒等檢測試劑盒。

The principle of RAA is as follows: Recombinase forms a complex with the primer, scans the double strands, invades the double strand and opens the double strand, then the single-stranded binding protein keeps another strand in a single-stranded state, polymerasis is then responsible for extension and amplification in the presence of DNTP, Repeating this process, the amplification signal will be detected by a portable instrument in 5-15 minutes.

Le principe de RAA est le suivant: la recombinase forme un complexe avec l’amorce, analyse les doubles brins, envahit le double brin et ouvre le double brin, puis la protéine de liaison simple brin conserve un autre brin dans un état simple brin, polymeraseis Puis responsable de l'extension et de l'amplification en présence de DNTP, en répétant ce processus, le signal d'amplification sera détecté par un instrument portable en 5-15 minutes.

Compared with traditional PCR technology, RAA technology has the advantages of isothermal, rapid, portable, sensitive, specific assay, cheap equipment, and simple operation. It is particularly suitable for POCT, disease early screening of acute infectious disease. Currently, RAA has been applied in the fields of inspection and quarantine, disease prevention and control, food safety, species identification, and environmental microbial detection. The commercial RAA detection kits include but not limited to human respiratory syncytial virus, adenovirus 3 and 7, hepatitis B virus, bordetella pertussis, mycobacterium tuberculosis, schistosome and African swine fever virus.

Comparée à la technologie PCR traditionnelle, la technologie RAA présente les avantages d’un équipement isotherme, rapide, portable, sensible, spécifique, bon marché, et avec une utilisation simple, etc. Elle convient au diagnostic des maladies infectieuses aigu?s, au POCT, et au dépistage précoce de la maladie, etc. Aujourd'hui, la technologie a été appliquée dans les domaines d'inspection et quarantaine, de prévention et contr?le des maladies, de sécurité sanitaire des aliments, d'identification des espèces, de détection microbienne dans l'environnement, de diagnostic in vitro et des autres. Des kits de test de la détection de technologie RAA commerciale contiennent mais pas limitent le virus respiratoire syncytial humain, les adénovirus humains de types 3 et 7, le virus de l'hépatite B humaine, la coqueluche, la tuberculose de mycobacterium, la schistosomiase et le virus de fièvre de la peste porcine africaine.

以下是RAA實驗操作演示:

The following is a demonstration of the RAA experiment:

Ce qui suit est une démonstration de l'essai RAA:

實驗所需物品包括:核酸樣本、核酸檢測試劑盒(熒光RAA法)、振蕩混勻儀、熒光檢測儀、離心管管架、PCR管架、移液器、移液器吸頭、廢液缸。

The items required for the experiment include: nucleic acid sample, nucleic acid detection kit (fluorescent RAA method), oscillating mixer, fluorescence detector, centrifuge tube rack, PCR tube rack, pipette, pipette tips and waste tank.

Les éléments requis pour l'expérience incluent: échantillon d'acide nucléique, kit de détection d'acide nucléique simple (méthode RAA fluorescente), homogénéisateur oscillant, détecteur de fluorescence, support de tube à centrifuger, support de tube PCR, pistolet de pipetage, tête de pistolet de pipetage, et réservoir de déchets

核酸檢測試劑盒提供:反應緩沖液、乙酸鎂、陰性質控品、陽性質控品、反應單元。

The nucleic acid detection kit provides:

reaction buffer, magnesium acetate, negative quality control, positive quality control, enzyme reaction unit

Le kit de détection d'acide nucléique contient: une solution tampon, de l'acétate de magnésium, une substance de contr?le négatif, une substance de contr?le positif et une unité de réaction.

實驗設置為:陰性對照、待檢核酸樣本、陽性對照。

The experimental settings were: negative control, nucleic acid sample to be tested, positive control.

Les paramètres expérimentaux étaient les suivants: contr?le négatif, échantillon d’acide nucléique à tester, contr?le positif.

實驗開始前首先打開儀器預熱。

The instrument is first warmed up before the start of the experiment.

L'instrument est d'abord réchauffé avant le début de l'expérience.

打開熒光檢測儀配套電腦軟件,選擇儀器對應的串口號并連接通訊。

Open the computer software of the fluorescence detector, select the serial port number corresponding to the instrument and connect the communication.

Ouvrez le logiciel du détecteur de fluorescence, sélectionnez le numéro de port série correspondant à l'instrument et connectez la communication.

取出反應單元并在管蓋上做好標記,將反應緩沖液、陰性質控品、陽性質控品解凍備用。

The enzyme reaction unit is taken out and marked on the tube cover, and the reaction buffer, negative quality control, positive quality control are thawed for use.

L'unité de réaction est retirée et marquée sur le couvercle du tube, et le tampon de réaction, le produit de contr?le négatif et le produit de contr?le positif sont décongelés pour être utilisés.

向各反應單元中依次加入反應緩沖液。

A reaction buffer was sequentially added to each enzyme reaction unit.

Un tampon de réaction a été ajouté de manière séquentielle à chaque unité de réaction.

向各反應單元管蓋上加入乙酸鎂。

Magnesium acetate was added to the tube cover of each enzyme reaction unit.

De l'acétate de magnésium a été ajouté à la couverture de tube de chaque unité de réaction.

陰性對照中加入陰性質控品,實驗管中加入核酸樣本,陽性對照中加入陽性質控品。

A negative quality control was added to the negative control tube, a nucleic acid sample was added to the experimental tube, and a positive quality control was added to the positive control tube.Un contr?le négatif a été ajouté au contr?le négatif, un échantillon d'acide nucléique a été ajouté au tube expérimental et un contr?le positif a été ajouté au contr?le positif.

加樣時需根據樣品濃度由低到高依次加樣。加完一個樣品時需將反應單元的蓋子扣上,防止交叉污染。

When loading, it is necessary to add samples according to the sample concentration from low to high. When the sample is added, the lid of the reaction unit needs to be buckled to prevent cross-contamination.

Lors du chargement, il est nécessaire d'ajouter des échantillons en fonction de la concentration de l'échantillon de faible à élevée. Lorsque l'échantillon est ajouté, le couvercle de l'unité de réaction doit être plié pour éviter la contamination croisée.

將反應單元對稱放入振蕩混勻儀中,點擊預處理鍵混勻離心。

Put the reaction unit symmetrically into the oscillating mixer, and click the pretreatment button to mix and centrifuge.

Placez l'unité de réaction de manière symétrique dans le mélangeur oscillant et cliquez sur le bouton de prétraitement pour mélanger et centrifuger.

將混勻好的試劑放入熒光檢測儀中,點擊運行鍵進行熒光檢測。

Place the mixed reagent into the fluorescence detector and click the Run button to perform fluorescence detection.

Placez le réactif mélangé dans le détecteur de fluorescence et cliquez sur le bouton Exécuter pour effectuer la détection de la fluorescence.

實時擴增曲線如視頻所示,5-15分鐘即可觀測到擴增結果。

Real-time amplification curves As shown in the video, amplification results can be observed in 5-15 minutes.

Les courbes d'amplification en temps réel, comme le montre dans la vidéo, les résultats de l'amplification peuvent être observés en 5 à 15 heures.

運行結束后根據試劑盒說明書設定斜率參數,軟件會將分析結果顯示在左側。

After the end of the run, set the slope parameter according to the kit instructions, and the software will display the analysis result on the left side.

Après la fin de l'analyse, définissez le paramètre de pente en fonction des instructions du kit. Le logiciel affichera le résultat de l'analyse sur le c?té gauche.

以上是熒光RAA法核酸檢測試劑盒實驗操作演示。

The above is a demonstration of the experimental operation of the fluorescent RAA nucleic acid detection kit.

Ce qui précède est une démonstration du fonctionnement expérimental du kit de détection d’acide nucléique RAA fluorescent.

RAA技術還可以應用于凝膠電泳,試紙條,反向雜交芯片等檢測方法。

RAA technology can also be applied to gel electrophoresis, test strips, reverse hybridization chips and other detection methods.

La technologie RAA peut également être appliquée à l'électrophorèse sur gel, aux bandelettes réactives, aux puces d'hybridation inverse et à d'autres méthodes de détection.

感謝您的觀看。

Thanks for your watching.

Merci de votre attention.

                

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